Morfologija eritrocitov, fazna kontrastna mikroskopija

Fazno kontrastna mikroskopija je diagnostični postopek, ki se uporablja v urologiji in nefrologiji (preučevanje ledvic) za pregled in oceno citomorfoloških vitalnih vzorcev (vzorec z živimi celicami) pri hematuriji in diagnostiki usedlin v urinu. Izjemen pomen te metode temelji zlasti na možnosti za diagnostiko, ki je pomembna za oceno morfologije eritrocitov (oblika rdeče kri celic), ki lahko zagotovi dragocene informacije o izvoru morebitne hematurije (kri v urinu) ali eritrociturije (rdečih krvnih celic v urinu). Fazno kontrastna mikroskopija usedline urina je idealen za ocenjevanje različnih oblik eritrocitov.Uvedba fazno kontrastna mikroskopija v rutinsko diagnostiko lahko gledamo kot na velik napredek, saj lažje ločimo patognomonične sestavine urina od nepatoloških artefaktov. Fazna kontrastna mikroskopija je glede na diferenciacijo artefaktov boljša od mikroskopije s svetlim poljem, ki je bila uporabljena do uvedbe fazne kontrastne mikroskopije. Če je prisotna nejasna ali nedokončna ugotovitev, lahko poseganje po tem postopku prihrani manj koristne ukrepe, kot je radiološka ali cistoskopska diagnoza (cistoskopija) za glomerulno hematurijo (glejte spodaj), s čimer se zmanjšajo stroški in prihrani čas zdravljenja.

Indikacije (področja uporabe)

Fazno kontrastna mikroskopija se v urologiji in nefrologiji uporablja za proučevanje morfologije eritrocitov:

• Ocena citomorfoloških vitalnih vzorcev pri hematuriji in diagnozi usedlin v seču. Indikacija:> 6-8 eritrocitov/ l, ki ga je mogoče zaznati v urinu ali testu pozitivne žilice. V okviru morfologije eritrocitov se diferenciranje glomerularne hematurije od ne-ledvične eritrociturije izvede z odkrivanjem dismorfne (glomerularne) in evmorfne eritrocitov.
• Dismorfno hematurijo glomerularnega izvora najdemo pri bolnikih z membransko in membranoproliferativni glomerulonefritis, pa tudi IgA nefropatijo, žariščno in segmentno nefrosklerozo ter lupusni nefritis. Pri glomerulni hematuriji se eritrociti potiskajo skozi poškodovane kletne membrane glomerularnih kapilar in povzročajo škodo. Mikroskopsko prepoznamo dismorfne eritrocite, ki jih imenujemo tudi akantociti (= eritrociti z "ušesi Mickey Mouse").
• Evorfno hematurijo (postglomerularno hematurijo) najdemo pri bolnikih z ledvične ciste pri prelomu v votli sistem, mehurja bilharzija, kri primesi iz nožnice (nožnice), poškodba po namestitvi a kateter mehurja, kri motnje strjevanja itd.

Postopek

Načelo fazne kontrastne mikroskopije temelji na interferenci svetlobnih žarkov v snopu mikroskopa, ki lahko doseže visoko kontrastno sliko neobdelanih celic. Zgradba in delovanje faznega kontrastnega mikroskopa:

• Obročasta odprtina, kondenzator, obročasta fazna plošča in objektiv so še posebej pomembni za delovanje faznega kontrastnega mikroskopa. Z vstavitvijo obročaste odprtine v kondenzator in fazne plošče v objektiv se povzroči ločitev nefraktiranih in difraktiranih svetlobnih žarkov. Posledica zakasnitve valovne dolžine difraktiranih svetlobnih žarkov povzroča fazno razliko, zaradi katere so strukturni detajli pregledanega mikroskopskega objekta temnejši od okoliškega medija. Fizično, faza trombociti pretvori razlike faz ali poti v razlike amplitud. Zaradi teh amplitudnih razlik se podoba predmeta v mikroskopu pojavi z medsebojnim ukinjanjem ali ojačevanjem neposrednih svetlobnih žarkov, ki prehajajo skozi objekt in se na njem ločijo.
• Pomanjkljivost tega načela je torej dejstvo, da idealni fazni pripravki niso pravilo, saj se amplitudni učinki običajno nalagajo na fazne učinke.
• Na podlagi principa slikanja struktur z amplitudnimi razlikami so obstoječe celične strukture predstavljene kot stopnjevani odtenki sive, odvisno od njihove lastne optične Gostota. Za izboljšanje razmnoževanja struktur je treba uporabiti tanke pripravke in fazo trombociti Odvisno od narave posamezne faze trombocitilahko dosežemo pozitivne in negativne fazne kontraste, zaradi česar so zanimivi predmeti prikazani bodisi temnejši bodisi svetlejši od njihove okolice.
• Pri fazno kontrastni mikroskopiji je še posebej pomembno omeniti to nekroza (smrt celic) se lahko zaradi izpostavljenosti svetlobi in dodatne poškodbe vitalnih celic zgodi razmeroma hitro. Kot rezultat tega hitrega nekroza ocenjevanja diapozitivov je treba izvesti v eni do dveh urah, da se ohrani veljavnost diagnostičnega ukrepa. Tako ta časovna omejitev pri ocenjevanju vitalnih vzorcev običajno zahteva dokumentacijo s fotomikrografijo ali po potrebi z mikrokinematografijo. Fotomikrograf je fotografija mikroskopske slike, posnete s kamero, pritrjeno na mikroskop. Z mikrokinematografijo obstaja možnost zajemanja predmetov pod mikroskopskim opazovanjem v gibljivih slikah.