Test ELISA je laboratorijski zdravniški pregled, med izvajanjem katerega pride do tako imenovane reakcije antigen-protitelo. Preskusiti je mogoče različne antigene, ki igrajo pomembno vlogo v humani ali veterinarski medicini. Za izvajanje testa v Nemčiji so pooblaščeni samo pooblaščeni laboratorijski inštituti.
Kaj je postopek?
V okviru laboratorijskih zdravstvenih pregledov test ELISA spada med tako imenovane imunološke postopke. Skozi testni postopek beljakovine molekule je mogoče zaznati v povsem različnih telesnih tekočinah. ELISA je okrajšava za encimski imunski imunski sorbenski test. Gre torej za angleško oznako, ki se je uveljavila v nemški medicinski uporabi. Test ELISA spada med tako imenovane imunološke postopke v okviru laboratorijskih zdravstvenih pregledov. Testni postopek lahko uporabimo za odkrivanje beljakovin molekule v najrazličnejših telesnih tekočinah. Odkrivanje le-teh molekule po drugi strani omogoča sklepanje o nekaterih boleznih ali kliničnih slikah, zato zdravniki tudi diagnozo odvisno od rezultata takega testa ELISA. Preskusni postopek je zato zelo pomemben v vsakdanji klinični praksi, bodisi v ambulanti ali v bolnišnici. Ustrezni telesnih tekočinah, na primer celo kri ali tekočine iz spoji, se pošljejo v laboratorij takoj po prevzemu od pacienta. To so ponavadi precej nujni vzorci, ker domači material velja za občutljivega in ga je treba pregledati čim prej. Tako imenovani prekomerno shranjeni vzorci lahko vodi do lažno negativnih rezultatov, ker je patološki beljakovin ki jih je treba zaznati, so se medtem zmanjšale ali popolnoma poslabšale. Tako igrajo tako imenovani preanalitiki pomembno vlogo pri ELISA; sumljive ali negativne rezultate je treba ponovno ponoviti, če so prisotni ustrezni klinični simptomi.
Funkcija, učinek in cilji
Za pravilno izvedbo testov v pooblaščenem medicinskem laboratoriju so nujno potrebne epruvete in tako imenovane mikrotitrske plošče. Te plošče s finimi polkonkavnimi vdolbinami so narejene iz posebne plastike in so vsake prevlečene z zelo specifičnim protitelesom. Če je antigen, ki ga je treba zaznati, prisoten v telesni tekočini, ki jo je treba pregledati, potem pride do specifične reakcije antigen-protitelo po tako imenovanem principu zaklepanja in ključa. Material za vzorce lahko vstavite v plošče bodisi ročno s pomočjo pipet bodisi popolnoma samodejno. V sodobnih laboratorijskih medicinskih inštitutih se za diagnostiko ELISA uporabljajo le popolnoma avtomatizirani sistemi. Vendar jih mora nadzorovati usposobljeno osebje, medicinsko-tehnični laboratorijski pomočniki. Za tako imenovani notranji in zunanji nadzor kakovosti je odgovorno tudi laboratorijsko osebje, nadrejeno medicinskemu osebju za laboratorijsko medicino, nalezljiva bolezen epidemiologije in mikrobiologije. Po prvi preskusni seriji, tj. Potem, ko je bil material pipetiran na plošče, so se specifični antigeni v vzorcu, če so bili prisotni, že vezali na protitelesa na plastični plošči. Nato se izpere s fiziološko fiziološko raztopino, da se odstranijo moteči dejavniki, kot so neželeni antigeni oz beljakovin od priprave. Ta korak je zelo pomemben, da se izognemo lažno pozitivnim reakcijam. Lažno pozitiven rezultat, ki ga interpretira laboratorij, ima lahko usodne posledice za bolnika. V drugem koraku testa se doda še eno protitelo, ki je povezano z encimom. To označeno protitelo se veže tudi na antigen. V tretjem in zadnjem koraku dodamo posebno barvilo v določeni količini, ki ga v večji ali manjši meri razgradijo še prisotni encimski ostanki. Razgradi se lahko samo tak encim, ki prej ni bil vezan na antigen skupaj s protitelesom. Prosti encim lahko cepi dodano barvilo. Natančno količino razcepljenega barvila lahko natančno določimo z drugo laboratorijsko metodo, tako imenovano fotometrijo. To omogoča natančne zaključke, ali je antigen v vzorčnem materialu sploh prisoten in, če je, koliko. Test ELISA se uporablja ne samo za začetno diagnozo ali za potrditev suma diagnoze nekaterih bolezni in kliničnih slik, ampak tudi za spremljanje njihovega napredka. Če antigen koncentracija v testu postane nižji med terapija, se terapija šteje za uspešno.
Tveganja, neželeni učinki in nevarnosti
Test ELISA dobi informativno vrednost predvsem z odkrivanjem antigenih struktur v telesnih tekočinah. Test omogoča tako imenovano kvalitativno, a tudi polkvantitativno in kvantitativno izjavo o sumu prisotnosti nekaterih antigenov v telesnih tekočinah. Celo kri za test ni mogoče uporabiti, le krvni serum. Neposredni test na pacientu, na primer iz kapilare kri od konica prsta, tako kot pri nekaterih drugih seroloških testih do danes ni mogoče. V humani medicini se test ELISA uporablja predvsem za odkrivanje antigenov pri bakterijskih, virusnih ali glivičnih okužbah. Poleg tega so vsi pozitivni rezultati hepatitis serologijo ponovno preverimo s testom ELISA. Seveda hormoni, na primer nosečnost hormona HCG, lahko določimo tudi s testom ELISA. Če se med nosečnost, natančno poznavanje koncentracija hormona nosečnosti v krvi zelo pomaga diagnostično in terapevtsko. Druga indikacija za test je odkrivanje tako imenovanih paraproteinov v urinu, saj se na primer pojavljajo v različnih tumorske bolezni, kot je multipli mielom. Test ELISA še danes izvajajo v mnogih laboratorijih, vendar ga strokovnjaki štejejo za zastarelega. Imunska reakcija povezana z encimi test ELISA je bil v zadnjih letih vse bolj nadomeščen z radioaktivno označenimi protitelesa, ki zagotavljajo še boljši kvantitativni rezultat merjenja. Ti testi se imenujejo tudi RIA, radioimunski absorpcijski test. Drugi posebni napredki ELISA so lahke kemijske metode, kot sta luminiscenca ali fluorescenca.
