Fluorescenčna hibridizacija in situ (FISH) je genetska presejalna metoda za odkrivanje DNA (deoksiribonukleinska kislina) v jedrih posameznih celic.
Ta metoda vključuje uporabo specifičnih sond DNA, ki lahko zagotovijo samo informacije o genomskih regijah, za katere je uporabljena sonda specifična.
Indikacije (področja uporabe)
- Sum številčne kromosomske aberacije:
- Odkrivanje številčnih kromosomskih nepravilnosti (npr. Trisomija 21).
- Za kvantifikacijo mozaikov za kromosomske aberacije (npr. V Ullrich-Turnerjev sindrom).
- Odkrivanje mikrodelecij (npr. Monosomija 22q11.2).
- Odkrivanje kromosomskih aberacij (npr. kronična limfocitna levkemija (CLL), ne-Hodgkin limfom).
Zgornje indikacije analizira interfazni FISH (za podrobnosti glej "Laboratorijski postopek").
Postopek
Potreben material
- Heparinska kri (najmanj 1-2 ml)
Priprava pacienta
- Ni potrebno
Moteči dejavniki
- Ni znano
Laboratorijska metoda
Fluorescenčna hibridizacija in situ (FISH) vključuje uporabo fluorescentno označenih DNA sond (FISH sonde). Ti se lahko vežejo na določeno mesto DNA na kromosomu, ki se imenuje hibridizacija. Po ali po vezavi fluorescentno označene sonde lahko ovrednotenje opravimo z mikroskopom. V tem procesu se določi število fluorescenčnih signalov znotraj medfaznih jeder. Poleg tega ocena lokacije (npr. Premestitev / premik lokacije / v drug kromosom) v metafazi kromosomi mogoče.
Ko so drugačne fluorescentne barvila se v postopku FISH uporabljajo za različne ciljne DNA, se imenuje večbarvna FISH. To omogoča popolno vizualizacijo genoma.
V nekaterih primerih sonda DNA ni neposredno označena s fluorescentnim barvilom, kar imenujemo posredni postopek. Namesto tega je označen s snovmi, kot so biotin ali digoksigenin. Ta metoda velja za bolj zapleteno, vendar je bolj občutljiva.
